核酶(ribozyme)是一类独特的RNA分子，具有自我剪切和催化性质。根据天然核酶锤头状 、发夹状、斧头状结构特性，人工合成具有催化活性的RNA片段（人工核酶），其特异性序列 通过碱基配对识别并结合靶RNA，催化裂解靶RNA，抑制基因表达，特别是有害基因的表达。核 酶具有序列特异性，不编码蛋白而无免疫性，又可重复利用等优点。
核酶能特异地切割HBV前基因组RNA，使其丧失模板活性，如针对HBcAg mRNA设计的核酶 ，可有限的剪切HBV mRNA；针对HBV前C/C区基因的锤头状核酶，经体外转录后可定点切割靶R NA，在HepG2细胞亦可显著抑制HBeAg、HBsAg的表达和HBV DNA复制；针对HBVpgRNA第2029～2 031nt, 2044～2046nt和2049～2051nt位点所设计的3组锤头状核酶，可有效的切割靶RNA，抑 制或阻断HBV的复制，并可减少变异病毒逃逸的机会。HCV基因组核心区高度保守，其5'-NCR含 有唯一的翻译起始位点，且全长5'-NCR对病毒复制和装配也必不可少，因而抗-HCV核酶设计是 针对C区和5'-NCR以及针对mRNA二级结构的单链间隙，在细胞内外均能抑制HCV病毒。针对HCV 负链RNA的锤头状核酶，可降低细胞内正链RNA水平，提示其具有阻断HCV RNA复制作用。HDV的 基因链和抗基因链均具有核酶活性，能催化自我切割和自我连接，其发挥作用的结构为假结样 (pseudoknot)结构，它最可能是导致核酶活性的结构。 为了使核酶成功地用于临床治疗，首先要从以下几方面进行研究。
1. 设计最佳的核酶结构 首先要确定核酶的类型。锤头状核酶对靶序列的要求稍低，且 分子较小，易于获得较高产量，也较经济，是目前广泛使用和首选的类型，其次是选择靶RNA , 核酶的作用效率与其裂解的靶序列有关，不同的NUH(N为A、C、G和U；H为A、C和U)序列能使 其裂解效率改变100倍以上。锤头状核酶包括二个侧翼的臂，核酶可以借助该臂识别产底物的 NUH序列，然后催化核酶裂解RNA3'端的NUH三联子。选择合适长度的侧翼对提高核酶作用效应极其重要，一般认为设计6～9个nt可获最佳作 用效率。
2. 寻找有效的导入及表达系统 最常用的载体是选择病毒载体系统，如腺病毒载体或逆 转录病毒载体。
3. 提高核酶在细胞内的稳定性 为了稳定核酶在细胞内的结构，可对核酶结构进行特定 的化学修饰。 4. 改善和提高核酶活力 核酶是一类独特的金属离子结合酶，金属离子如Mg++的存在及 其浓度对核酶高效的催化活性及结构稳定是必不可少的。此外，核酶的切割活性加以附加促进 剂—核蛋白可使催化活性大大提高。多位点核酶联合，分别瞄准一条mRNA上不同位点进行多位点破坏，可以提高核酶的剪切 率，可阻止HBV变异逃逸核酶的攻击和减少空间构型的影响，这种方法有人称为第二代核酶。 采用定向技术，将HDV核酶加以改造，利用外膜为HBsAg特点，包装含有HDV核酶的弱毒株 ，导入靶器官肝脏，起到治疗乙肝作用。
5. 减少影响核酶作用效率的因素，某些抗生素能与一些核酶相互作用而影响其催化效率 ，在应用时应加以注意。
随着研究的深入，将能更合理地设计核酶序列，以提高核酶的特异性和活性；同时对RN A在细胞内定位，转运等的认识的加深，能带动我们确定核酶和靶序列与定位问题。通过对核 酶进行更佳修饰，可望极大提高核酶的稳定性。相信核酶能成为治疗病毒性肝炎特异、高效的药物之一。刘克洲教授（杭州，浙江医科大学附属第一医院） 感谢病友：lxx 提供相关资料 |
