HCV感染的肝炎患者中HCV的病毒学研究

陈元鼎  刘名英  余文霖*    李嘉琦  彭梅  李惠琼*  周曾全*

  【摘要】 目的：对丙型肝炎及丙型肝炎病毒(HCV)同甲型肝炎病毒(HAV)或乙型肝炎病毒(HBV)混合感染的肝炎患者中的HCV进行病毒学检测研究，分析HAV或HBV的混合感染对HCV－RNA和抗－HCV检出率的影响。方法：运用HCV－RNA RT－PCR检测技术和抗－HCV检测技术，对云南地区肝炎患者进行了HCV感染的病原学检测研究，同时对HAV或HBV的混合感染对HCV感染的肝炎患者中HCV－RNA和抗－HCV检出率的影响进行比较研究。结果：HCV－RNA的检出率为96.0%(143/149)，抗－HCV检出率为28.2%(42/149)；在单一HCV感染的丙型肝炎患者中，HCV－RNA及抗－HCV检出率分别为100％(22/22)和47.4%(9/19)；HCV同HAV混合感染的肝炎患者中，HCV－RNA的检出率为87.5%(14/16),抗－HCV的检出率为31.3%(5/16);HCV同HBV混合感染的肝炎患者中，HCV－RNA的检出率为100%(28/28)，抗－HCV检出率为12%(3/25)。结论：云南地区部分肝炎患者中抗－HCV检出率大大低于HCV－RNA检出率，此结果可能反映了云南地区部分流行的HCV基因型或血清型的高度变异；HAV或HBV的混合感染也会大大降低HCV感染的肝炎患者血清抗－HCV检出率。
  【关键词】 丙型肝炎；肝炎病毒，丙型；检出率

    我们对云南地区部分肝炎患者血清样品进行了HCV感染的病原学检测，并对影响其检测结果的因素作了进一步分析。

材料与方法

    1.血清样品：选自昆明市传染病医院治疗的临床诊断为肝炎的患者，本研究中分析的病例均为HCV感染者，部分病例合并HAV或HBV感染，而排除了其它肝炎病毒感染。患者平均年龄为32.6岁(4－77)岁。
    2.病毒学检测：
    2.1抗－HAV：北京科卫临床诊断试剂厂生产的试剂盒（北京302医院诊断试剂中心提供），检测患者血清中HAV－IgM（EIA法）。操作按说明书进行。
    2.2.HBV检测：北京生物化学免疫制剂中心生产的试剂盒对患者血清中HBV感染标志物进行检测。这些标志物包括：HBsAg, 抗－HBs, 抗－HBc, HBeAg, 抗－HBe和HBV－DNA。两种或两种以上标志物阳性者判为HBV感染阳性，否则为阴性。
    2.3HCV检测：用美国Abbott公司第二代ELISA试剂盒(AxSYM, Abbott Laboratoies Diagnostics Division, USA)检测患者血清抗－HCV；用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测血清中HCV基因组5'末端非编码区(HCV-5'NCR)。
    2.4  抗－HDV检测：北京科卫临床诊断试剂厂生产的试剂盒（北京302医院诊断试剂中心提供），检测患者血清中抗－HDV（EIA法）。操作按说明书进行。
    2.5 抗－HEV检测：用新加坡生产的检测抗－HEV试剂盒(Genelabs Diagnotics PTE LTD, Singapore)检测患者血清中HEV－IgM（EIA法）。操作按说明书进行。
    2.6 HGV检测：用北京医科大学肝病研究所生产的试剂盒检测患者血清HGV-IgM(EIA法)；用RT－PCR法检测HGV－RNA。操作按说明书进行。

结  果

1. HCV感染的肝炎患者中HCV RNA和抗－HCV检测

       在这205例HCV感染者中，HCV RNA检出率为97.5%(198/203)，抗－HCV检出率为28.3%(43/152)，前者远远大于后者。

2. HCV感染的肝炎患者中HCV－RNA和抗－HCV的同时检测

       在HCV感染者中HCV RNA和抗－HCV检测皆阳性的病例仅占23.8%(36/151)，HCV检测阳性而抗－HCV检测阴性者占大多数(70.9%, 107/151)。与前面的结果一致，HCV RNA的检出率远远高于抗－HCV的检出率。

3. 其它肝炎病毒混合感染对HCV感染病毒学检测的影响
       HCV RNA和抗－HCV检出率在HCV感染组分别为100%(22/22)和47.4%(9/19)，在HCV＋HAV感染组分别为87.5%(14/16)和31.3%(5/16)，在HCV＋HBV感染组分别为100%(28/28)和12%(3/25)。

讨  论

    在国内以往的报道中，丙型肝炎患者HCV RNA的检出率约为38.1%-71.4%，抗－HCV的检出率约为60.0%-96.4%，抗－HCV检出率均高于HCV RNA检出率。仅在少数特殊肝炎病例（如肝癌患者）中出现HCV RNA检出率高于抗－HCV的情况。本研究中HCV RNA检出率远远高于抗－HCV，提示云南地区肝炎患者中流行的HCV的抗原性可能与以往其它地区流行的不同。
    我们用位于HCV-5’NCR高度保守的核苷酸序列作引物检测患者血清中的HCV RNA，并且在进行RT－PCR前血清中的HCV RNA作了纯化和浓缩，所以检出率得到大大提高。目前商品化的以基因型I、基因型II和基因型Ⅲ病毒抗原为检测抗原的检测抗－HCV试剂盒，在检测以其它基因型（或血清型）为主要流行病毒时，就会出现许多的假阴性。此外，其它肝炎病毒的混合感染也会影响抗－HCV的检出率，特别是HBV的混合感染可大大降低抗－HCV的检出率。进一步研制能检测不同血清型（或基因型）丙型肝炎病毒抗原的试剂盒具有重要的价值和意义；对其它肝炎病毒感染的同时检测在丙型肝炎的临床治疗和预后中也具有重要的诊断价值。

参考文献

（略）

作者单位：650107    昆明市，中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所；昆明市传染病医院*

摘自中华肝脏病杂志

返回